重组2型脊髓灰质炎病毒样颗粒的制备及免疫原性初步研究

作者：徐洋; 英志芳; 许琳; 王剑锋; 刘悦越; 李洪艳; 韩琪琪; 晏巧玲; 朱涛^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2021, 41(10).

• 脊髓灰质炎病毒
• 病毒样颗粒
• 昆虫细胞
• 重组杆状病毒

目的构建共表达P1和3CD的重组杆状病毒, 利用昆虫细胞重组表达2型脊髓灰质炎病毒(poliovirus type 2, PV2)的病毒样颗粒(virus-like particle, VLP), 制备PV2-VLP进行初步免疫原性研究。方法基于粉纹夜蛾细胞(High 5)密码子偏好性, 将PV2的P1基因和3CD基因进行序列优化, 并对P1基因进行稳定性突变, 构建突变型rBac-PV2-P1s-3CD和野生型rBac-PV2-P1-3CD杆状病毒。Western blot分别检测目的蛋白表达量, 离子交换层析纯化PV2-VLP, 透射电镜观察VLP高级结构确定组装效率。免疫大鼠评估免疫原性。结果成功构建了可稳定表达P1s蛋白和3CD蛋白的重组杆状病毒。Western blot结果表明热稳定性突变后VLP产量相比野生型有所提高。电镜观察发现直径约30 nm的三维结构, 表明VLP成功组装。动物实验结果表明, 重组制备的PV2-VLP具有免疫原性, 且能有效刺激产生中和抗体。结论用昆虫细胞-杆状病毒表达系统可成功制备有效的VLP类疫苗, 为PV-VLP疫苗的研制提供参考。

• 单位
  天津科技大学; 中国食品药品检定研究院; 生物工程学院