DMRIE-C脂质体介导CLEC2B转染Jurkat细胞及其转染率的影响因素

作者：柳君如; 张峻岭; 徐士福; 程琳

来源：山东医药, 2014, 54(09): 20-22.

• 脂质体,DMRIE-C
• 小干扰RNA
• Jurkat细胞

目的探讨由DMRIE-C脂质体介导将CLEC2B siRNA转染入Jrukat细胞的过程中,对Jurkat细胞的影响,并分析其转染率的影响因素。方法通过DMRIE-C转染CLEC2B siRNA入Jrukat细胞,台盼蓝染色法观察细胞活性,流式细胞仪检测siRNA转染率,RT-PCR检测CLEC2B基因沉默效率。结果 DMRIE-C脂质体对细胞的损伤程度与两者比例相关,对转染体系600μL(其中200μL密度为2×106/mL淋巴细胞)进行转染时,脂质体达3μL时可损伤细胞,不利于后续试验进行;siRNA∶DMRIE-C比例为3μL∶2μL,siRNA终浓度约80 nmol/L时,转染率最高,可达30.7%,转染后CLEC2B基因抑制率可达(35±1.9)%(t=15.9,P<0.05)。结论 DMRIE-C脂质体可实现目的 siRNA对Jurkat细胞有效转染,同时转染中脂质体与细胞比例、血清、操作方式等因素均可对转染效率产生一定的影响。

• 单位
  天津市中医药研究院附属医院; 浙江大学医学院附属儿童医院; 石家庄市妇幼保健院