一种含多个CCP结构域的新型基因的克隆及生物学特性初探

作者：韩聚强; 方言; 严景华; 焦园园; 吕秋军; 黄翠芬; 杨晓; 叶棋浓

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2005, 25(12): 963-969.

DOI：10.3760/j:issn:0254-5101.2005.12.002

• CCP22
• 克隆
• 表达
• 定位
• 乳腺癌

目的克隆并分析新型基因CCP22,研究其结构及初探生物学特性。方法常规分子克隆、生物信息学分析、Westernblot、RT-PCR。结果利用酵母双杂交技术从人乳腺文库中分离到一种含有22个补体调控蛋白(complement control protein,CCP)序列元件的新基因,命名为CCP22。生物信息学分析发现,该基因定位于人染色体9q31.2-32,共15个外显子,基因编码序列全长4494bp,编码1497个氨基酸。将CCP22基因全长编码序列克隆于真核载体中,该表达载体转染人胚肾细胞293T后获得的表达产物经Westernblot证实CCP22属于分泌蛋白。将CCP22与绿色荧光蛋白(EGFP)标签融合后证实CCP22主要分布在细胞核外。Northernblot证实,内源性CCP22mRNA转录本全长约6kb。RT-PCR检测表明,CCP22在正常乳腺细胞株中高表达,而在多种乳腺肿瘤细胞株中不表达或低表达。结论CCP22在乳腺肿瘤发生发展中可能发挥重要作用。

• 单位
  军事医学科学院; 放射医学研究所