兔VX2结直肠癌模型薄层大体切片的制作

作者:孙国洋; 陆风旗; 张追阳; 倪建明; 吴小平; 巫丹萍; 张熔熔; 黄洪波
来源:中华实验外科杂志, 2017, 34(01): 154-157.

摘要

目的探讨兔VX2结直肠癌(CRC)模型薄层大体切片的制作,为其实验研究提供观察平台。方法新西兰大白兔15只,开腹下将瘤块接种于不同结肠、直肠壁。接种后46周行CT增强扫描,观察成瘤及转移,一旦成瘤或最迟于第6周处死模型兔,并冰冻至少24 h后采用1.2 mm厚度电锯片予以冠状位大体病理切割(室温23℃),切割厚度分别为2 mm(2只)、3 mm(10只)及5 mm(3只);大切片于切割后于不同时间段(05 min、1015 min及>20 min)作编号摄影,完毕将切片放入相应编号且含10%福马林液容器内待后续病理检查。结果3 mm切片总数182片(1520片,平均18.2片/只),破损2片,完好率98.9%(180/182);5 mm切片总数40片(1114片,平均13.3片/只),无破损,完好率100%;2 mm切片总数45片(2124片,平均22.5片/只),破损32片,完好率28.9%(13/45片)。5 mm、3 mm与2 mm切片完好率比较,差异均有统计学意义(P=0.009、0.002);5 mm与3 mm切片完好率比较,差异无统计学意义(P=0.964)。05 min时段摄影切片表层因冻霜而结构层次不分明;>20 min摄影因冰层融化致切片无法翻动且不同解剖结构间有一定移位;1015 min时段切片表层冻霜融化,但摄影层次分明且组织间结构仍无移位。肿瘤总接种成功率66.7%(10/15只)。5 mm切片中成瘤2只,共找到淋巴结6枚(平均3枚/只)。其中1只找到4枚淋巴结(1枚转移性)及肝转移灶1个(6mm);3 mm切片中成瘤7只,找到淋巴结29枚(平均4.1枚),其中2只找到7枚转移性淋巴结及肺转移灶2个(710 mm)。3 mm较5 mm切片显示更完整转移灶。结论采用3 mm厚度切割能获得连续、完整的薄层兔VX2 CRC模型大体切片,为肿瘤分期提供一个有效的动物实验观察平台。