鼻咽癌肿瘤干细胞中mTOR信号通路的激活及雷帕霉素对其的抑制作用

作者：张宇; 林刃舆; 张子恒; 陈健; 杨春光; 周磊; 张悦

来源：临床耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2015, 29(13): 1179-1184.

DOI：10.13201/j.issn.1001-1781.2015.13.010

• 鼻咽癌
• 肿瘤干细胞
• mTOR信号通路
• 雷帕霉素

目的:研究鼻咽癌肿瘤干细胞中mTOR信号通路蛋白的表达,初步探讨雷帕霉素抑制鼻咽癌肿瘤干细胞增殖的机制。方法:用无血清培养法收集鼻咽癌肿瘤球细胞,用CCK8检测成球细胞及CNE2细胞的增殖活性,Western blot检测干细胞标记物蛋白CD44、OCT4、SOX2和mTOR及其信号通路下游相关蛋白P70S6、4EBP1的表达;CCK8法测不同浓度雷帕霉素(0、0.1、1.0、10.0、100.0、1 000.0nmol/L)对鼻咽癌肿瘤球细胞及CNE2细胞抑制率的差异,Western blot检测雷帕霉素作用肿瘤球细胞后mTOR及其信号通路下游相关蛋白P70S6、4EBP1的表达。结果:成球细胞在含血清培养液中增殖较CNE2细胞明显,与CNE2细胞相比,成球细胞OCT4、SOX2呈过度表达(均P<0.05),而在CD44的表达上,2组间差异无统计学意义(P>0.05);在mTOR、P70S6、4EBP1的表达上,2组细胞无明显差异(P>0.05),而在各自激活态的磷酸化水平(P-mTOR、P-P70S6、P-4EBP1)的表达上,成球细胞较CNE2明显呈过表达状况(均P<0.05);不同浓度雷帕霉素作用鼻咽癌成球细胞及CNE2细胞,对比两者半数抑制率浓度,成球细胞为27.59nmol/L,CNE2细胞为78.12nmol/L,雷帕霉素对成球细胞具有更强的抑制作用;不同浓度雷帕霉素作用成球细胞后,P-mTOR、P-P70S6、P-4EBP1的表达随浓度的升高而呈逐渐下降趋势,而mTOR、P70S6、4EBP1的表达差异无统计学意义。结论:鼻咽癌肿瘤干细胞mTOR信号通路蛋白呈过度表达,雷帕霉素可通过干预mTOR信号通路来抑制其增殖活性。

• 单位
  中南大学湘雅医学院; 温州医科大学附属第一医院; 湖北医药学院