摘要
目的建立三氧化二砷(As2O3)的耐药细胞株,进一步从分子水平研究其耐药机制。方法采用高度短时间接触培养方法建立耐As2O3的白血病细胞系(SHI-1/AS2)。细胞倍增时间和耐药倍数测定采用MTT法;细胞周期和细胞免疫表型测定采用流式细胞分析术;常见的10个耐药基因检测和比较采用实时定量PCR(RQ-PCR)。结果耐As2O3的白血病细胞系SHI-1/AS2的细胞倍增时间与SHI-1相似,差异无统计学意义(P>0.05)。SHI-1/AS2细胞G0/G1期细胞少于SHI-1细胞,而G2/M、S期细胞则多于SHI-1细胞,差异均有高度统计学意义(均P<0.01)。SHI-1/AS2细胞对As2O3的耐药倍数是SHI-1的2.7倍,差异有统计学意义(P<0.01)。SHI-1/AS2细胞的集落形成率高于SHI-1细胞。SHI-1/AS2细胞的耐药相关基因Bcl-2有明显上调,Bax、Fas及MGMT下调,而其他耐药相关基因无明显变化。结论建立一株对As2O3产生耐药的白血病细胞系SHI-1/AS2,耐药倍数是SHI-1的2.7倍,其耐药机制与Bcl-2、Bax和Fas基因介导的细胞凋亡调控有关。
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单位苏州大学附属第一医院