吗啡对人肝癌细胞Huh7诱导HUVECs血管生成能力的影响及其分子机制

作者：张志发; 朱梦娇; 周志强; 杨少兵^*

来源：山东医药, 2020, 60(35): 34-37.

• 肝癌
• 吗啡
• 缺氧诱导因子1α
• 血管内皮生长因子
• 细胞
• 血管生成能力

目的观察吗啡对人肝癌细胞Huh7诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成能力的影响,并探讨其可能的分子机制。方法取对数生长期Huh7细胞,加入不同浓度吗啡(0、0.01、0.1、1、10、100、1 000μmol/L)作用不同时间(0、6、12、24 h),根据细胞增殖率及细胞毒性检测结果选择1μmol/L吗啡作用24 h为最佳条件。将Huh7细胞分为观察组和对照组,观察组加入1μmol/L吗啡作用24 h,对照组不予特殊处理。收集两组上清液,与ECM基础培养液混合后孵育HUVECs,采用管腔形成实验观察其血管生成能力(以管腔形成数量表示);采用Western blotting法检测细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达,ELISA法检测上清液中血管内皮生长因子(VEGF)表达。将Huh7细胞分为si-HIF-1α组、si-NC组和空白对照组,si-HIF-1α组、si-NC组分别采用脂质体LipofectaminTM2000法转染si HIF-1α及其阴性对照,空白对照组不予特殊处理,各组均加入1μmol/L吗啡作用24 h,比较各组血管生成能力及HIF-1α、VEGF表达。结果与对照组比较,观察组管腔形成数量及HIF-1α、VEGF表达均升高(P均<0.05)。与si-NC组、空白对照组比较,si-HIF-1α组管腔形成数量及HIF-1α、VEGF表达均降低(P均<0.05)。siNC组与空白对照组管腔形成数量及HIF-1α、VEGF表达比较均无统计学差异(P均> 0.05)。结论吗啡可促进Huh7细胞诱导HUVECs血管生成,其机制可能与激活HIF-1α表达、促进VEGF分泌有关。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院