间充质干细胞对肺移植缺血再灌注损伤大鼠高迁移率族蛋白B1表达的影响

作者：魏立; 韩志军; 徐磊; 李基伟^*

来源：中华医学杂志, 2018, 98(25).

• 肺移植
• 再灌注损伤
• 高迁移率族蛋白B1
• 间充质干细胞

目的建立大鼠肺移植缺血再灌注损伤模型, 静脉注射骨髓间充质干细胞(MSCs), 比较血清及肺组织中晚期炎症介质高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在mRNA及蛋白水平的变化。方法健康雄性8～10周SD大鼠40只, 分为4组每组10只, 包括假手术组、肺移植缺血再灌注组、生理盐水对照组和MSCs治疗组。除假手术组大鼠仅行开胸不进行肺移植手术外, 其他组大鼠在麻醉下行左侧单肺移植, 肺移植后开放肺静脉形成再灌注。缺血再灌注组不做任何处理;MSCs治疗组尾静脉注射MSCs悬液1 ml(1.0×107个/ml);生理盐水组鼠尾静脉注射等剂量生理盐水。四组大鼠均在缺血再灌注24 h后取血处死, 取左肺组织备用。测定氧合指数、肺湿/干比值及制作HE病理切片。通过ELISA检测血清中HMGB1水平的变化, 通过RT-PCR和Western印迹检测四组肺组织HMGB1表达的变化。结果缺血再灌注24 h各组氧合指数分别为383±15、174±24、170±30、217±21, 肺移植缺血再灌注组及生理盐水明显低于假手术组(均P<0.01), 注射MSCs后氧合指数高于缺血再灌注组(P<0.01)。HE染色病理结果提示缺血再灌注组大鼠比假手术组肺泡间隔增厚, 肺泡内出现渗出液, 并见少量炎症细胞, 提示肺损伤;注射MSCs后肺泡水肿液体减少, 肺泡间隔增厚减轻, 炎症细胞浸润减少;生理盐水组病理表现同缺血再灌注组。四组湿/干比分别为4.16±0.12、5.38±0.19、5.24±0.15和4.47±0.14,缺血再灌注组大鼠高于假手术组(P<0.05), 注射MSCs后湿/干比低于缺血再灌注组(P<0.05)。ELISA结果显示缺血再灌注组[(287±37)ng/ml]、生理盐水组[(260±24)ng/ml]和MSCs治疗组[(101±14)ng/ml], 血清中HMGB1水平显著高于假手术组[(41±5) ng/ml], 均P<0.01。其中MSCs治疗组HMGB1水平显著低于缺血再灌注组和生理盐水组(均P<0.01)。缺血再灌注组血清HMGB1水平与氧合指数(r=0.759,P<0.05)和湿/干比呈正相关(r=0.725,P<0.05)。RT-PCR结果显示HMGB1 mRNA水平在假手术组最低, 缺血再灌注组明显提高, 经过MSCs治疗后显著降低。Western印迹在蛋白水平检测结果与mRNA水平结果一致。结论肺移植手术可以引起肺组织中HMGB1水平的增高, 而输入MSCs治疗后肺组织HMGB1水平有显著的降低。MSCs有可能在肺移植中对移植肺发挥保护作用。

• 单位
  河南省人民医院