乙型肝炎病毒X蛋白抑制肝癌细胞系中DKK2的表达

作者：王晓艳; 杜虹; 王伟; 权会琴^*

来源：基础医学与临床, 2020, 40(10): 1348-1352.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2020.10.007

• 肝癌
• 乙型肝炎病毒X蛋白
• DKK2
• Wnt/β-catenin
• 甲基化转移酶

目的分析不同肝癌细胞系中乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对DKK2表达水平的影响及其可能机制。方法应用编码乙型肝炎病毒X蛋白的腺病毒(Ad-HBx)感染HepG2和SMMC7721细胞,利用免疫荧光技术和PCR技术检测X基因的表达、Western blot检测DKK2的蛋白表达水平;应用甲基化转移酶抑制剂(DAC)处理细胞,利用Western blot检测DKK2、Dnmt1、Dnmt3a和Dnmt3b的表达;通过沉默甲基化转移酶,利用Western blot检测DKK2的表达。结果 Ad-HBx感染HepG2和SMMC7721细胞后,HBx mRNA相对表达倍数分别上调61.12倍和50.24倍(P<0.05),DKK2的蛋白表达水平分别下调1.61倍(P<0.05)和3.33倍(P<0.05),Dnmt1和Dnmt3a蛋白表达水平显著升高;相较于Ad-HBx感染组,DAC处理后DKK2蛋白表达水平上调2.27倍(P<0.05),Dnmt3a蛋白水平显著下调,Dnmt1和Dnmt3b蛋白水平无显著变化;沉默Dnmt1和Dnmt3a后,DKK2蛋白表达水平显著上调。结论 HBx通过上调Dnmt1及Dnmt3a发挥甲基化作用来抑制DKK2的表达,进而激活Wnt/β-catenin信号通路,参与HBV相关肝癌的发生。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学