基于Mx启动子和荧光素酶报告基因定量检测鸡Ⅰ型干扰素生物学活性的研究

作者：陈伟业; 葛金英; 肇慧君; 胡森; 温志远; 曹文雁; 王喜军; 黄克和; 步志高

来源：畜牧兽医学报, 2008, (01): 123-128.

• 鸡I型干扰素
• 生物活性检测
• 鸡Mx启动子
• 萤光素酶 chicken type I interferon
• bioactivity assay
• chicken Mx promoter
• luciferase

为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启动子的作用下获得转录表达;荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理细胞6 h后就可以检测;对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍。该检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 南京农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所