细胞穿膜肽TAT以非融合形式递送蛋白质的能力探究

作者：窦佳; 吉丽娜^*; 华子春^*

来源：药学学报, 2023, 58(08): 2384-2390.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2023-0266

• 细胞穿膜肽
• TAT
• 非融合表达
• 递送形式
• TAT-EGFP
• 穿膜能力

穿膜肽TAT被证实可用于不同类型药物分子的递送,包括核酸、蛋白质和小分子药物等。TAT可以通过共价连接和非共价连接等形式递送分子。但是迄今TAT采用非共价连接形式递送蛋白质分子的报道较少,也未有研究比较过融合形式和非融合形式下TAT递送蛋白质能力的差异。为了探究非融合形式对于TAT递送蛋白质能力的影响,本文采用了荧光显微镜观察和流式细胞检测法在细胞水平上探究了TAT以非融合形式递送增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)进入人非小细胞肺癌细胞A549的能力,发现其可以穿膜递送EGFP,并且递送能力与TAT浓度呈现正相关。同时,本文还表达纯化了TAT与绿色荧光蛋白质EGFP的融合蛋白TAT-EGFP并考察了其穿膜能力。本文将两种形式的递送效果进行定量对比后发现:当TAT以融合蛋白形式递送EGFP时,其递送能力要明显优于TAT以非融合形式递送EGFP的能力。本文报道了TAT能够以非融合形式递送EGFP,尽管其递送效果有待进一步提高,但是该递送形式在操作便捷性上有着不可比拟的优势,是未来一种值得选择的递送方案。

• 单位
  医药生物技术国家重点实验室; 常州南京大学高新技术研究院; 生命科学学院; 南京大学; 医药生物技术研究所