辛酸沉淀结合阴离子交换层析纯化马IgG的研究

作者：杨俊杰; 段丽娟; 金学敏; 孙烈英; 任正祥; 孟祥玉; 张金; 高建军^*

来源：微生物学免疫学进展, 2015, 43(01): 17-20.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2015.01.004

• 破伤风抗毒素
• 辛酸
• 离子交换层析
• 实验设计(DoE)

目的以辛酸沉淀结合离子交换层析纯化破伤风抗毒素马免疫血浆,获得高质量的马IgG,为抗毒素F(ab’)2的制备奠定基础。方法通过对辛酸沉淀马血浆过程中的pH、辛酸浓度以及血浆稀释倍数的实验设计(DoE),研究不同条件对IgG纯度、效价、比活性、浊度以及过滤速度的影响,确定各工艺参数的可操作区间,并结合Capto DEAE阴离子交换层析以流穿模式进一步纯化IgG。结果马血浆经一步辛酸沉淀获得的IgG纯度(SDSPAGE)大于92%、分子排阻色谱(SEC)纯度大于95%,比活性较血浆提高2.14±0.29倍;辛酸沉淀后的IgG样品经阴离子交换层析,可有效去除聚合体以及小分子杂质,将纯度提高至95%(SDS-PAGE)和98%(SEC)。结论马血浆经辛酸沉淀和阴离子交换层析可获得高纯度、高比活的IgG。

• 单位
  兰州生物制品研究所有限责任公司