先天性长QT综合征KCNE1基因的克隆及其真核表达载体的构建

作者：李伟; 杨钧国; 杜戎; 徐秋梅; 管思明; 柯琴梅; 王斌

来源：医学研究生学报, 2007, (11): 1126-1129+1234.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2007.11.009

• 长QT综合征
• KCNE1基因
• 克隆
• 真核表达载体

目的:克隆先天性长QT综合征KCNE1基因,并构建真核表达载体。方法:从人胎盘组织中提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出KCNE1基因;采用T-A克隆法,将KCNE1基因克隆入pCR2.1 TOPO载体中,经限制性酶切基因重组后,构建真核表达载体pEGFP-N1-KCNE1,经DNA测序鉴定,用E ffectene转染试剂介导转染HEK293细胞。结果:采用基因克隆和重组法,得到了KCNE1真核表达载体pEGFP-N1-KCNE1,并在HEK293细胞中得到了表达。结论:KCNE1基因的克隆及其真核表达载体的构建和表达为进一步的功能研究奠定了基础。

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 协和医院