黄芩苷通过NF-κB信号对气道上皮黏液调节因子MUC5AC和CFTR表达的影响

作者：张艳; 张彩丽; 刘燕; 陈玉龙; 彭梦薇; 桑亚洲; 吴耀松^*

来源：陆军军医大学学报, 2022, 44(05): 441-447.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202109016

• 黄芩苷
• NF-κB
• MUC5AC
• 囊性纤维化跨膜传导调节因子
• 气道黏液

目的 基于核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号探讨黄芩苷调控气道上皮黏蛋白5AC(mucin 5AC, MUC5AC)和囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, CFTR)的表达以改善病理性气道黏液的机制。方法 采用MTT法检测不同浓度黄芩苷对H292细胞(人肺癌细胞)活性的影响并确定用于后续实验的黄芩苷浓度；将细胞分为空白对照组、模型组、NF-κB抑制剂组(PDTC组，100μmol/L)和黄芩苷组(200μg/mL)。采用IL-1β诱导H292细胞建立体外黏液高分泌炎症细胞模型，再以相应浓度的药物干预24 h后，采用ELISA方法检测各组细胞上清中MUC5AC、IL-8、TNF-α的含量，检测各组细胞中MUC5AC和CFTR蛋白的含量；采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中MUC5AC和CFTR mRNA的表达；采用Western blot检测各组细胞中p65和IκB的表达。结果 MTT检测结果显示，当黄芩苷浓度为200μg/mL时，细胞活性在80%以上，可作为后续实验的安全浓度。与空白对照组比较，模型组细胞培养上清及细胞质中MUC5AC分泌水平及IL-8、TNF-α、p65、MUC5AC mRNA表达均明显升高(P<0.05),IκB蛋白表达、CFTR蛋白含量、CFTR mRNA的表达显著降低(P<0.05);与模型组比较，PDTC组细胞培养上清中MUC5AC分泌水平，IL-8、TNF-α、p65蛋白表达及MUC5AC mRNA表达显著降低(P<0.05),细胞质中MUC5AC水平、CFTR蛋白含量、IκB蛋白表达、CFTR mRNA的表达显著升高(P<0.05);与模型组比较，黄芩苷组细胞培养上清中MUC5AC分泌水平、IL-8和TNF-α分泌水平、p65蛋白表达降低(P<0.01),CFTR蛋白含量、IκB蛋白表达、CFTR mRNA表达均显著增加(P<0.01),而MUC5AC mRNA表达差异无统计学意义。结论 黄芩苷通过抑制NF-κB活性，减少MUC5AC的分泌，增加CFTR的表达，减轻气道炎症。

• 单位
  河南中医药大学