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摘要
目的 探讨低氧条件下编码缺氧诱导因子2α(HIF-2α)的内皮含PAS结构域蛋白1(EPAS1)基因在K562人红白血病细胞向红系分化中的作用。方法 将K562细胞分为常氧对照组、常氧诱导组(40μmol/L氯化血红素和0.1 ng/mL阿糖胞苷诱导)、低氧对照组(50 mL/L O2)、低氧诱导组。培养5 d后收集细胞，流式细胞术分析CD235a+CD71+细胞比例，联苯胺染色检测血红蛋白合成，CCK-8法检测细胞增殖，实时定量PCR检测EPAS1、胰岛素受体底物2(IRS2)、γ珠蛋白(γ-globin)mRNA表达，Wester blot法检测上述基因蛋白表达，分析低氧对K562细胞红系分化的影响；使用短发夹RNA(shRNA)敲低EPAS1,分析常氧及低氧下实验组(sh-EPAS1组)和对照组(sh-Control)红系分化的差异，明确EPAS1对K562细胞红系分化的作用。结果与常氧诱导组相比，低氧诱导组CD235a+CD71+阳性细胞显著增加，合成血红蛋白增多，EPAS1、γ-globin、 IRS2表达明显上升，红系分化程度更高；与sh-Control相比，sh-EPAS1组CD235a+CD71+阳性细胞减少，合成血红蛋白降低，细胞增殖能力下降，EPAS1、γ-globin、 IRS2表达显著降低，红系分化受阻。结论 低氧能显著上调K562细胞EPAS1表达，促进细胞向红系分化。
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