摘要
目的 探讨微小RNA(miR)-142-3p靶向转化生长因子-β受体1(TGF-βR1)对滋养细胞侵袭、迁移的影响,阐明miR-142-3p与TGF-βR1基因的靶向关系及其作用机制。方法 以HTR-8/SVneo为研究对象,分为NC组(未进行任何处理)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-142-3p组(转染miR-142-3p mimics)。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力;Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞中miR-142-3p、TGF-βR1 mRNA表达水平;Western blot检测细胞TGF-βR1、磷酸化Smad同源物2(p-Smad2)和磷酸化Smad同源物3(p-Smad3)表达水平。生物信息预测miR-142-3p与TGF-βR1的靶向作用关系,并使用荧光素酶报告实验验证。结果 与NC组、miR-NC组比较,miR-142-3p组细胞p-Smad2、p-Smad3蛋白、mRNA水平明显升高(P<0.01)。与NC组、miR-NC组比较,48h和72h时,miR-142-3p组细胞增殖能力明显降低(P<0.01)。与NC组、miR-NC组比较,miR-142-3p组细胞侵袭及迁移能力明显降低(P<0.01)。与si-NC组比较,48h和72h时,si-TGF-βR1组细胞增殖能力明显升高(P<0.01)。与si-NC组比较,si-TGF-βR1组细胞侵袭及迁移能力明显升高(P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测结果提示TGF-βR1为miR-142-3p的靶基因。结论 过表达miR-142-3p可能通过抑制TGF-βR1/Smad通路抑制滋养层细胞的增殖、侵袭和迁移。
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