人血管抑素AK(1-3)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

作者：海燕; 扈廷茂; 扈会平; 汪伟成; 苏慧敏; 王永胜

来源：内蒙古大学学报(自然科学版), 2005, (01): 58-62.

• 血管抑素
• 表达载体
• 诱导 angiostatin
• expression vector
• induction

用6月龄大月份流产的新鲜肝脏组织为材料,提取总RNA,通过反转录得到cDNA,并以此为模板,经PCR得到人Angiostatin基因的AK(1-3)片段.将此PCR产物直接与载体pMD18-T连接,转化大肠杆菌DH5α.经蓝白菌落筛选,PCR和酶切检测,筛选出阳性克隆,命名为pMDA,测序证明克隆序列与GenBank发表序列一致,大小为858bp.用Sal 和Bgl 酶切将该基因插入载体pQE40,并转化宿主菌M15[pREP4].经质粒电泳PCR和酶切检测筛选阳性克隆,得到表达载体pQEA,插入基因与载体上小鼠DHFR基因重组形成嵌合基因.在30℃,2×YT培养基(Kan25μg/mL+Am...

• 单位
  生命科学学院; 内蒙古大学