牛血浆中乙酰氨基阿维菌素HPLC-FLD检测方法的建立

作者：张贺超; 杨亚军; 刘希望; 李世宏; 秦哲; 白莉霞; 李剑勇^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2022, (23): 1-13.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.12.0312

• 高效液相色谱荧光法
• 乙酰氨基阿维菌素
• 内标法
• 衍生化
• 固相萃取

为了研究乙酰氨基阿维菌素(eprinomectin, EPR)缓释注射液在牛体内的药代动力学情况，试验建立了检测牛血浆中EPR浓度的高效液相色谱荧光(HPLC-FLD)法，并进行了系统的方法学验证，向空白牛血浆样品中加入内标阿维菌素(AVM),用乙腈沉淀蛋白质，再用固相萃取柱进行净化，洗脱液浓缩至干后以N-甲基咪唑和三氟乙酸酐对EPR及AVM进行衍生化，采用HPLC-FLD法进行检测。该检测方法所用色谱柱为Elite Hypersil ODS(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相为甲醇∶乙腈∶水=64∶32∶4;流速为1 mL/min;柱温为35℃;荧光检测器激发波长为365 nm,发射波长为463 nm。结果表明：建立的HPLC-FLD检测方法中EPR的保留时间为8.076 min, AVM保留时间为12.922 min。检测限为0.5 ng/mL,定量限为1 ng/mL。血浆样品中EPR浓度在1～100 ng/mL之间时，血浆药物浓度与峰面积之比呈良好的线性关系，线性方程为y=0.912x+0.924,相关系数(R2 )为0.994 7。准确度为80.79%～119.20%,批内相对标准偏差为2.02%～11.87%,批间相对标准偏差为4.16%～10.83%。不同储存条件下血浆样品中EPR稳定性良好，符合生物样品分析的具体要求。说明试验建立的HPLC-FLD法操作简便，灵敏度高，干扰少，适用于牛血浆中EPR的检测。

• 单位
  中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所