干扰素-λ1/白介素-29抑制脓毒症患者血清C5a诱导的中性粒细胞胞外诱捕网相关的凝血酶生成

作者：俞秋兴; 杜鸿; 张海方; 张勇^*

来源：中华急诊医学杂志, 2020, 29(11).

• 白介素29
• C5a补体
• 中性粒细胞胞外诱捕网
• 凝血酶

目的探讨脓毒症血栓形成的炎症环境中血清来源C5a补体能否激活多型核中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils, PMNs)释放中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs), 以及干扰素-λ1/白介素29(interferon-λ1/interleukin 29, IFN-λ1/IL-29)是否具有抑制NETs相关凝血酶生成的作用。方法健康志愿者和脓毒症患者的外周血样分别来自2018—2019年苏州大学附属第二医院门诊和住院部, 体外研究脓毒症患者血清C5a刺激的健康志愿者外周血分离的PMNs细胞, IL-29和抗CD88单抗作为NETs释放调节因子, 免疫荧光分析(immunofluorescence, IF)PMNs上NETs的释放水平, 免疫印迹技术(immuno blot, IB)评估PMNs上组织因子(tissue factor, TF)的表达, 荧光光谱法(fluorescence spectroscopy, FS)测定上清液中循环DNA水平, 酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)测定凝血酶-抗凝血酶(thrombin-antithrombin, TAT)复合物水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析, 以P<0.05为差异有统计学意义。结果以脓毒症患者血清C5a诱导的健康志愿者PMNs释放的NETs表达水平(20.5±3.7)%为对照组, IL-29和抗CD88单抗抑制了脓毒症患者血清C5a诱导的健康志愿者PMNs上TF表达的NETs释放, 采用IF技术测定的表达水平分别为(5.0±1.5)%、(7.3±3.1)%, 差异均有统计学意义(q=9.23和8.73, 均P<0.01)。IL-29和抗CD88单抗抑制了脓毒症患者血清C5a诱导的健康志愿者PMNs上TF水平, IB测定的TF表达水平分别为(0.52±0.03)%、(0.57±0.02)%, 与脓毒症患者血清C5a诱导的健康志愿者PMNs的TF表达水平(0.81±0.03)%进行比较, 差异均有统计学意义(q=3.44和3.21, 均P<0.05)。IL-29和抗CD88单抗降低了NETs相关的TAT复合物的水平, 分别为(3.3±0.4)ng/mL、(4.6±0.7)ng/mL, 与脓毒症患者血清C5a诱导的健康志愿者PMNs释放的NETs相关的TAT复合物水平(7.8±0.7)ng/mL比较, 差异均有统计学意义(q=6.77和5.27, 均P<0.01)。结论脓毒症患者血清来源的C5a诱导健康志愿者PMNs内TF的累积和表达TF的NETs释放, 血清C5a促进了NETs依赖性凝血酶的生成。IL-29具有抑制C5a诱导的NETs释放及其相关的凝血酶生成。

• 单位
  苏州大学附属第二医院; 苏州大学; 第二临床医学院