犬瘟热病毒N基因环介导等温扩增检测方法的建立

作者：何丽丽; 关玮琨; 江馗语; 朱颖; 刘文鑫; 冯瑜菲; 胡文霞; 师东方

来源：中国预防兽医学报, 2013, (02): 138-141.

• 犬瘟热病毒
• N基因
• 环介导等温扩增 canine distemper virus
• N gene
• loop-mediated isothermal amplification

为建立犬瘟热病毒(CDV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究根据GenBank中CDVN基因保守序列设计合成了2对LAMP引物,内引物FIP、BIP和外引物F3、B3。以CDVN基因重组质粒(pMD-CDV-N)为模板,经反应条件优化、特异性试验、敏感性试验及临床样品检测。检测结果显示,该方法于61℃水浴60min即可完成反应,最低检出量为70个拷贝,比RT-PCR灵敏10倍。该检测方法仅对CDV产生阳性扩增,而对狂犬病毒,犬细小病毒,犬腺病毒Ⅱ型扩增结果均为阴性。用建立的LAMP方法检测临床样品,检测结果与RT-PCR检测结果一致。本方法简便,特异,有利于CDV的临床检测。

• 单位
  东北农业大学