EGFP标记的A20细胞构建小鼠B细胞播散型淋巴瘤模型

作者:王娜; 王迪; 唐玉婷; 黄亮; 周剑峰
来源:现代生物医学进展, 2014, 14(25): 4801-4805.
DOI:10.13241/j.cnki.pmb.2014.25.001

摘要

目的:A20细胞是来源于同系Balb/c小鼠大B细胞淋巴瘤的细胞系,能通过尾静脉接种建立小鼠B细胞播散型淋巴瘤的模型,但由于该细胞系缺乏细胞表面特异性标志而难于监测。本研究使用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记A20细胞,试图建立易于监测的小鼠B细胞播散型淋巴瘤模型。方法:用含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体将标记基因EGFP转入A20细胞,通过流式分选出EGFP+的A20细胞,体外培养后通过尾静脉注射接种于同系Balb/c小鼠体内,用流式细胞仪监测其外周血EGFP+细胞的百分率。当小鼠出现消瘦、毛发竖立、嗜睡等体征时,将小鼠处以安乐死;取动物脏器行石蜡包埋、病理切片、HE染色。结果:尾静脉注射1×106细胞于6只Balb/c小鼠体内,接种后15天可在外周血中检测到EGFP+细胞,平均生存时间为29.6±0.8天;在肝脏、脾脏、脊椎和淋巴结等多脏器成瘤,流式检测瘤细胞EGFP表达阳性。结论:经尾静脉注射接种A20细胞可建立小鼠B细胞播散型淋巴瘤模型,A20细胞经含EGFP的慢病毒标记后易于通过流式进行监测,为通过动物体内试验评价靶向治疗的疗效提供了保证。

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