人源中和性抗高致病性禽流感病毒H5N1基因工程全抗体的研制

作者：孙丽娜; 刘琴芝; 王敏; 李川; 李梓; 胡晓芬; 朱莉莉; 李群; 王世文; 舒跃龙; 梁米芳; 李德新

来源：病毒学报, 2008, (03): 165-171.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001912

• 禽流感病毒
• 噬菌体表面呈现
• 基因工程抗体
• Fab抗体 avian influenza A (H5N1) virus
• phage display
• recombinant human monoclonal antibodies
• Fab antibody

运用噬菌体表面呈现技术,从禽流感病人恢复期血中获得淋巴细胞,通过基因工程手段,构建了人源抗H5N1禽流感病毒基因工程抗体文库。用纯化的人源H5N1禽流感病毒颗粒(A/Anhui/1/2005)及重组血凝素蛋白HA(A/VietNam/1203/2004)对Fab噬菌体抗体库进行富集筛选,成功地获得了抗禽流感病毒H5N1血凝素蛋白HA的人源单抗Fab段基因,并在大肠杆菌中获得有效表达。通过序列测定确定抗体轻重链型别,然后将阳性克隆的轻链和重链Fd段基因分别克隆入全抗体表达载体pAC-L-Fc后转染昆虫Sf9细胞,利用杆状病毒/昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达。用ELISA、IFA和流式细胞术对...

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 传染病预防控制国家重点实验室; 安徽省疾病预防控制中心