稳定表达丙型肝炎病毒HLA-A2限制性多表位基因C1R-AAD细胞克隆的建立

作者：韦三华; 张海; 董轲; 林芳; 王希; 李斌; 沈建军; 张利军; 张惠中

来源：中国生物制品学杂志, 2010, (07): 683-686.

DOI：10.13200/j.cjb.2010.07.16.weish.009

• 丙型肝炎病毒
• 表位
• 真核细胞
• 基因表达
• 转染 Hepatitis C virus(HCV)
• Epitopes
• Eukaryotic cells
• Gene expression
• Transfection

目的建立稳定表达丙型肝炎病毒(HCV)HLA-A2限制性多表位基因的C1R-AAD细胞克隆。方法合成人泛素基因(Ub)和HCVHLA-A2限制性多表位基因(Mep),分别克隆入原核表达质粒pRSET-A,构建多表位抗原基因的原核表达质粒pRSET-Ub-Mep。用BamHⅠ和HindⅢ双酶切质粒pRSET-Ub-Mep,得到复合多表位基因Ub-Mep,亚克隆入真核表达载体pcD-NA3.1(-),构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)-Ub-Mep,转染至C1R-AAD细胞,G418压力筛选后,通过有限稀释法获得稳定表达Ub-Mep融合蛋白的C1R-AAD细胞克隆,采用RT-PCR法检测稳...

• 单位
  第四军医大学