miR-506-3p对PIK3CA基因的靶向调控作用

作者:李振昊; 徐广贤; 高倩; 蒋丹; 徐向荣; 屈昱良
来源:宁夏医科大学学报, 2017, 39(05): 492-496.
DOI:10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2017.05.002

摘要

目的研究miR-506-3p对PI3K-Akt信号通路中关键基因PIK3CA的靶向调控机制。方法化学合成miR-506-3p过表达模拟物mimic及miR-506-3p抑制剂inhibitor;构建含有PIK3CA基因3’-UTR野生型及突变体到荧光素酶报告载体中;将测序结果正确的p MIR-Report-PIK3CA-Wt和p MIR-Report-PIK3CA-Mut重组质粒,与miR-506-3p的mimic/inhibitor及p RL-TK共转染至HEK-293T细胞,利用双荧光素酶报告系统和Western blot验证miR-506-3p与PIK3CA的靶向关系。结果测序结果显示p MIR-Report-PIK3CAWt和p MIR-Report-PIK3CA-Mut两个重组质粒构建成功,Western blot结果显示转染miR-506-3p mimic的293T细胞中PIK3CA蛋白表达下调(P<0.05);而转染miR-506-3p inhibitors的PIK3CA蛋白表达上调(P<0.05)。结论 miR-506-3p可作用于PI3K-AKt信号通路,通过靶向PIK3CA发挥其负性调控作用。

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