过表达基因elo1和ole1增强光滑球拟酵母Δmed15B菌株的低pH耐受能力

作者：齐艳利; 刘晖; 周配; 高聪; 刘立明^*

来源：微生物学报, 2021, 61(05): 1359-1369.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20200447

• 光滑球拟酵母
• Med15B
• 长链脂肪酸
• 不饱和脂肪酸
• 低pH耐受能力

【目的】研究中介体亚基Med15B(ORF CAGL0H06215g)介导的脂肪酸代谢影响光滑球拟酵母(Candida glabrata)耐受低pH胁迫的生理机制。【方法】在菌株Δmed15B中过量表达脂肪酸延伸酶基因elo1(ORF CAGL0L08184g)和Δ9去饱和酶基因ole1(ORF CAGL0I00418g),构建过表达菌株Δmed15B/elo1-ole1,然后与菌株Δmed15B和亲本菌株ATCC55对比分析基因elo1和ole1的表达水平、脂肪酸组分比例、细胞膜完整性和耐受能力在pH 2.0和pH 6.0条件下的差异。【结果】发现,在pH 2.0条件下过表达菌株Δmed15B/elo1-ole1:(1)基因elo1和ole1表达水平比菌株Δmed15B分别上调了4.1倍和3.3倍,与亲本菌株ATCC55相比分别上调了2.5倍和2.2倍;(2)脂肪酸平均链长延长至17.4,高于菌株Δmed15B的16.8和亲本菌株ATCC55的17.1;不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比值比菌株Δmed15B和亲本菌株ATCC55分别提高了53.1%和41.5%;(3)碘化丙啶(PI)染色细胞数占总检测细胞数的比例,与菌株Δmed15B和亲本菌株ATCC55比较分别下降了60.8%和37.7%;(4)细胞半抑制pH (胁迫)(IC50)值达到pH 2.3,比菌株Δmed15B的pH 3.7和亲本菌株ATCC55的pH 3.1具有更强的耐受能力。【结论】在菌株Δmed15B中过表达基因elo1和ole1能通过提高长链脂肪酸和不饱和脂肪酸含量,增强细胞对低pH胁迫的耐受能力。

• 单位
  食品科学与技术国家重点实验室; 江南大学