呼吸道病毒核酸快速检测方案的建立与应用

作者：黄媛媛; 王宇; 周承星; 周志超; 周炳亮; 刘文宽; 周荣; 曹虹

来源：生物工程学报, 2023, 39(09): 3838-3848.

DOI：10.13345/j.cjb.220941

• 呼吸道病毒
• 快速检测
• 实时荧光定量聚合酶链式反应
• 免提取呼吸道病毒处理试剂

本研究旨在建立一套便携、准确、操作简便的呼吸道病毒核酸快速检测方案。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitativereal-timepolymerasechainreaction,qRT-PCR)验证免提取的呼吸道病毒处理试剂(extraction-free respiratory virus treatment reagent, RTU)对病毒核酸处理的效果以及超快速荧光定量PCR仪(FQ-8A)对核酸扩增的效果；将RTU和FQ-8A结合构建呼吸道病毒核酸快速检测方案，通过荧光定量PCR仪中Ct值判断阳性检出率，以验证该方案检测临床样本时的准确性。结果表明，RTU与全自动核酸提取仪在提取效果上灵敏度相当；RTU在提取不同病毒类型样本时，与其他3种提取方法效果相当，但RTU提取时间少于5min;FQ-8A检测呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)及腺病毒(adenovirus, ADV)与对照仪器ABI-7500具有良好一致性，kappa系数分别为0.938(P<0.001)和0.887(P<0.001)，但FQ-8A耗时更短，扩增时间仅在0.5 h左右；RTU和FQ-8A相结合的快检方案与常规检测方案具有高度一致的检出率，其灵敏度为91.70%，特异度为100%,kappa系数为0.944(P<0.001)。总之，通过RTU与FQ-8A的结合构建了一套可在35 min内完成全部流程的呼吸道病毒核酸快速检测方案。该方案准确性高、操作简便，可为呼吸道病毒快速诊断和治疗提供重要支持。

• 单位
  呼吸疾病国家重点实验室; 南方医科大学; 公共卫生学院; 广州医科大学; 广州医科大学附属第一医院