摘要
目的 建立一种利什曼原虫的实时荧光定量PCR检测方法,快速准确的检测利什曼原虫,为黑热病防治提供技术支撑。方法 根据利什曼原虫Kinetoplast基因保守区序列,设计合成一对引物探针。用磁珠法在外周全血中提取利什曼原虫的DNA后,应用荧光定量PCR方法进行检测,灵敏度和特异度达到了设计要求,并应用在日常检测工作中。结果 对比r K39抗体检测方法,结果更加灵敏,并具有较高的特异性。该方法在黑热病疑似病例检测中特异性好;在犬血检测中对比r K39抗法差异有统计学意义(χ2=3.938,P=0.047)。结论 该方法能够快速准确地检测利什曼原虫,在黑热病实验室诊断、黑热病流行病学监测中具有极大的应用价值。
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单位山西省疾病预防控制中心; 阳泉市疾病预防控制中心