摘要
目的 优化现有spin-EB培养法,促进人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells, hiPSCs)分化生成巨核细胞(megakaryocytes, MKs)。方法 本研究通过将hiPSCs初始接种量从3 500个细胞/孔提高至8 000个细胞/孔,增加了形成EB的大小。通过观察分化过程中EB-造血细胞的产生时间,检测不同阶段CD34+造血干祖细胞、CD41+MKs的增殖情况,研究该优化方案是否促进hiPSCs向造血祖细胞(hematopoietic progenitor cells, HPCs)和MKs分化。结果 通过提高hiPSCs初始接种量,增加形成EB的大小可促进hiPSCs向HPCs和MKs分化的进程和细胞产生效率。结论 我们研究描述了一种优化的和可重复的分化方法,在相对短的时间内可以更高的产量从hiPSCs产生造血干祖细胞和成熟的巨核细胞。不断优化体外hiPSCs分化生成MKs和血小板的培养方案,并促进输血医学中大规模的体外血小板生成,具有重要的临床意义和广阔的科研前景。
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单位第一附属医院输血科; 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心; 中国人民解放军第二军医大学