鼠伤寒沙门菌中甲基化修饰调控PhoP活性的机制研究

作者：李建辉; 苏杨; 姚玉峰; 倪进婧^*

来源：上海交通大学学报 (医学版), 2019, 39(08): 827-833.

DOI：10.3969/j.issn.1674-8115.2019.08.004

• 鼠伤寒沙门菌
• PhoP
• 甲基化修饰
• STM140023
• 毒力

目的·探究鼠伤寒沙门菌转录调控因子PhoP的甲基化修饰与其活性的相关性,筛选PhoP的甲基转移酶。方法·Western blotting检测不同培养条件下鼠伤寒沙门菌中PhoP的甲基化水平变化。通过生物信息学预测候选的甲基转移酶,体内过表达预测的甲基转移酶后检测phoP及其下游基因的转录水平变化,找到可能的PhoP甲基转移酶,并体外验证该甲基转移酶能否甲基化PhoP。使用real-time PCR检测高浓度Mg2+、弱酸性等培养条件下,phoP与其甲基转移酶在转录水平的相对表达变化。结果·随着培养基中Mg2+浓度升高,PhoP甲基化水平上升;而经过弱酸刺激后,PhoP甲基化水平下降。生物信息学预测并筛选到9个甲基转移酶,其中体内过表达STM140023后,phoP及其下游基因的转录水平下降且PhoP蛋白水平也下降,但敲除STM140023对上述分子的表达无影响。体外甲基化酶促反应显示STM140023能够甲基化PhoP,体内过表达STM140023后也可提高PhoP的甲基化水平,且在抑制phoP表达的高浓度Mg2+培养条件下STM140023的转录水平升高。结论·STM140023是PhoP的甲基转移酶,甲基化修饰抑制PhoP活性。

• 单位
  上海交通大学; 基础医学院