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摘要
目的 探讨Smad7敲低后对原代心肌成纤维细胞增殖、迁移、胶原分泌和细胞表型转化的影响。方法 原代培养10只SD大鼠乳鼠的心肌成纤维细胞，免疫组织化学染色鉴定细胞。采用慢病毒转染方法敲低心肌成纤维细胞Smad7的表达，Western blotting验证Smad7蛋白敲低效率，实时无标记细胞仪检测心肌成纤维细胞的增殖情况，细胞划痕实验检测细胞的迁移情况，Western blotting检测Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。结果 成功培养心肌成纤维细胞，并进行细胞鉴定。慢病毒转染的心肌成纤维细胞感染复数(MOI)值为100,转染后88.33%的细胞表达绿色荧光蛋白，慢病毒敲低组Smad7的蛋白表达明显下调(P<0.05)。慢病毒敲低Smad7后细胞增殖明显下降(P<0.01),细胞迁移率明显减少(P<0.01)。与对照组相比，慢病毒敲低组细胞ColⅠ表达明显下降(P<0.01),α-SMA表达明显升高(P<0.01)。结论 Smad7表达敲低后，心肌成纤维细胞的细胞功能发生明显改变，这些改变可能与Smad7下调导致心肌纤维化程度加重有关。
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