摘要
目的:探讨毛钩藤碱对人宫颈癌Ca Ski细胞增殖、凋亡、转移、侵袭的影响及机制。方法:细胞活性与增殖检测(CCK-8)法检测细胞增殖活性,Hoechst 33258染色及流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链式反应检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),p53 mRNA表达,划痕实验检测细胞转移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测纤连蛋白(FN),基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测蛋白表达。结果:与空白组比较,毛钩藤碱可以呈剂量及时间依赖性的抑制Ca Ski细胞的增殖;8.0,16.0,32.0μmol·L-1毛钩藤碱组细胞凋亡率,Bax,p53 mRNA表达增加(P<0.05,P<0.01),Bcl-2 mRNA及磷酸化Src(p-Src),磷酸化信号转导和转录活化因子3(p-STAT3)蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,1.0,2.0,4.0μmol·L-1毛钩藤碱组细胞迁移率,穿膜细胞数,FN,MMP-2,MMP-9含量及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),波形蛋白(Vimentin),N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达降低(P<0.05,P<0.01),E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达增加(P<0.01)。结论:毛钩藤碱可以抑制人宫颈癌Ca Ski细胞的增殖、转移及侵袭,并能诱导凋亡,作用机制与调控Src/STAT3及HIF-1α/上皮间充质转化(EMT)信号通路有关。
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单位河北医科大学第一医院