解淀粉芽孢杆菌草酸脱羧酶基因的克隆、原核表达与活力测定

作者：白雪; 张慧莉^*; 黄冲; 遆秀秀; 冯斌

来源：江苏农业科学, 2019, 47(12): 66-70.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2019.12.013

• 解淀粉芽孢杆菌
• 草酸脱羧酶
• 克隆
• 原核表达
• 酶活测定

为进一步明确解淀粉芽孢杆菌C(10)的草酸脱羧酶基因的生物功能,克隆其关键基因对该基因进行原核表达。通过PCR技术克隆了淀粉芽孢杆菌C(10)的草酸脱羧酶基因,构建了原核生物表达载体pET28a-Baoxdc,对其进行表达与纯化。结果表明,扩增所获解淀粉芽孢杆菌C(10)的草酸脱羧酶全基因序列全长为1 161 bp,在大肠杆菌中进行表达,添加诱导剂IPTG、MnCl2至终浓度分别为0.6、6 mmol/L,诱导4 h时的酶活力和比活力最高,分别为3.793 2 U/mL和3.145 3 U/mg。

• 单位
  生命科学学院; 石河子大学