miR-218在高浓度葡萄糖诱导大鼠视网膜微血管内皮细胞凋亡中的作用

作者：郭闯; 刘学政^*

来源：眼科新进展, 2021, 41(02): 116-119.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2021.0024

• 葡萄糖
• 大鼠视网膜微血管内皮细胞
• miR-218
• Caspase-3
• 细胞凋亡

目的探讨miR-218在高浓度葡萄糖诱导大鼠视网膜微血管内皮细胞(rat retinal microvascular endothelial cells,rRMECs)凋亡中的作用及其相关机制。方法将rRMECs分为对照组、高糖组、miR-218阴性抑制组和miR-218抑制组。对照组细胞用DMEM低糖培养基培养;高糖组在培养基中添加D-葡萄糖,终浓度为25 mmol·L-1;miR-218抑制组及miR-218阴性抑制组是在高糖组培养基的基础上,按照说明书操作,利用Lipo2000将miR-218抑制剂和阴性抑制剂转染rRMECs,共同孵育24 h。提取各组rRMECs总RNA并分析miR-218含量,检测细胞活力,计算细胞凋亡率以及采用Western blot检测各组rRMECs Caspase-3蛋白表达,利用SPSS 19.0统计学软件对实验数据进行单因素方差分析并进行两两比较。结果对照组、高糖组、miR-218阴性抑制组、miR-218抑制组miR-218相对表达量分别为1.00±0.08、1.48±0.12、1.46±0.14、1.03±0.08;细胞活力分别为100.0%、(72.3±7.5)%、(70.7±9.3)%及(98.4±9.4)%;与对照组相比,高糖组和miR-218阴性抑制组的miR-218相对表达量明显升高(均为P<0.05),miR-218抑制组的miR-218相对表达量较对照组变化不显著(P>0.05);高糖组和miR-218阴性抑制组rRMECs细胞活力与对照组相比均明显降低(均为P<0.05),miR-218抑制组与对照组相比细胞活力未见明显变化(P>0.05)。对照组、高糖组、miR-218阴性抑制组、miR-218抑制组rRMECs细胞凋亡率分别为(2.3±0.0)%、(20.3±3.1)%、(23.1±3.2)%及(2.9±0.1)%;高糖组和miR-218阴性抑制组的细胞凋亡率均显著高于对照组(均为P<0.05);而miR-218抑制组与对照组相比,细胞凋亡率变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组rRMECs Caspase-3蛋白相对表达量为(18.6±2.3)%、高糖组为(43.3±4.5)%、miR-218阴性抑制组为(41.6±3.9)%、miR-218抑制组为(20.0±2.8)%。与对照组相比,高糖组和miR-218阴性抑制组的Caspase-3蛋白相对表达量明显增加(均为P<0.05),miR-218抑制组Caspase-3蛋白相对表达量变化不明显(P>0.05)。结论高浓度葡萄糖能促使rRMECs miR-218相对表达量增高;当miR-218相对表达量增高时,细胞凋亡明显,细胞活力显著下降,细胞内Caspase-3蛋白的相对表达量明显上调。

• 单位
  锦州医科大学