摘要
目的研究微小RNA-135a(microRNA-135a, miR-135a)靶向十号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN)对宫颈癌细胞增殖和转移能力的影响及作用机制。方法采用qRT-PCR检测宫颈癌细胞C33A、Caski、HeLa中miR-135a和PTEN mRNA的表达水平,选择miR-135a表达较高的宫颈癌细胞进行后续实验。Targetscan 7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验检测miR-135a对PTEN基因的靶向调控作用。常规培养宫颈癌细胞,将其分为NC组、miR-135a inhibitor组和miR-135a inhibitor+si-PTEN组,采用Lip2000进行各组小分子化合物的转染。MTT实验检测3组细胞的增殖能力,流式细胞仪检测3组细胞的凋亡率,Transwell实验检测3组细胞的转移能力。Western blot检测3组细胞中Akt/mTOR信号通路的活性。结果与永生化宫颈上皮细胞H8相比,miR-135a在宫颈癌细胞系中的表达增加,在宫颈癌细胞Caski中的表达最高(P<0.05)。与永生化宫颈上皮细胞H8相比,PTEN在宫颈癌细胞系中的表达降低(P<0.05)。miR-135a靶向调控PTEN。与NC组相比,miR-135a inhibitor组和miR-135a inhibitor+si-PTEN组宫颈癌细胞增殖和转移能力降低、宫颈癌细胞凋亡率增加(P<0.05)。而与miR-135a inhibitor组相比,miR-135a inhibitor+si-PTEN组宫颈癌细胞增殖和转移能力增加、宫颈癌细胞凋亡率降低(P<0.05)。与NC组相比,miR-135a inhibitor组和miR-135a inhibitor+si-PTEN组细胞中pAkt和pmTOR蛋白表达降低,而与miR-135a inhibitor组相比,miR-135a inhibitor+si-PTEN组pAkt和pmTOR蛋白表达增加(P<0.05)。结论 miR-135a靶向调控PTEN表达促进宫颈癌细胞增殖和转移能力,抑制细胞凋亡。