科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 探讨具核梭杆菌感染引起巨噬细胞焦亡的作用及机制。方法 巨噬细胞RAW264.7与具核梭杆菌共同培养，设置未感染组和具核梭杆菌感染组（以MOI和感染时间设置梯度）。乳酸脱氢酶和荧光双染检测细胞坏死率；Western blot检测焦亡相关蛋白caspase-1、GSDMD和IL-1β的活化情况；qRT-PCR分析NLRP3、NLRC4、AIM2、NLRP1炎症小体激活情况，采用siRNA敲低可能参与调控的关键分子，分为siRNA敲低组与阴性对照组，比较两组细胞在具核梭杆菌感染时的焦亡和坏死率，验证其调控作用。结果 具核梭杆菌感染组的细胞肿胀破碎、胞内出现空泡，乳酸脱氢酶释放增加，PI阳性细胞数增多，坏死率升高（P<0.05）;Western blot结果显示caspase-1、GSDMD和IL-1β被活化且呈MOI和时间依赖性升高（P<0.05）;qRT-PCR筛选出NLRC4可能参与调控，siRNA敲低NLRC4可抑制具核梭杆菌引起的caspase-1/GSDMD通路的激活，减少细胞坏死率和炎症因子IL-1β的表达（P<0.05）。结论 具核梭杆菌感染能够诱导巨噬细胞RAW264.7经caspase-1/GSDMD信号通路发生焦亡并释放炎症因子，且NLRC4炎症小体发挥关键的调控作用。
- 单位
