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摘要
背景尽管目前关于甲状腺相关性眼病(TAO)在基础和临床研究方面已取得了一些进展,同时积累了一定量的关于发病机制的材料和证据,但目前国内外关于TAO的研究仍然很少,临床仍缺少有效的治疗方法和药物。与此同时,在传统中医领域,中医药辨证治疗TAO疗效肯定、不良反应少且复发率低,但其作用机制不明确,药物作用靶点不明。目的观察CD40L对人球后成纤维细胞(RFs)表面基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-2、MMP组织抑制剂(TIMP)-1、TIMP-2表达的影响以及平突散系列中药复方的干预效果。方法 2016年9月选取35只SPF级SD雄性大鼠用于制备泻火平突散、活血平突散、养目平突散含药血清。实验中所用的人眼球后结缔组织来源于2例眼创伤患者(2014年取材于郑州大学第一附属医院眼科),体外培养RFs成功后,随机分为7组,其中空白组:给予正常培养液;血清组:给予含10%正常大鼠血清的培养液;CD40L组:给予含100 ng/ml CD40L的培养液;CD40L+血清组的培养液:给予含100 ng/ml CD40L和10%正常大鼠血清的培养液;泻火平突散组:给予含有100 ng/ml CD40L和10%含药血清的培养液;活血平突散组:给予含有100 ng/ml CD40L与10%含药血清的培养液;养目平突散组:给予含有100 ng/ml CD40L与10%含药血清的培养液。免疫细胞化学染色法检测各组MMP-1、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达。结果 CD40L组MMP-1、MMP-2活性低于空白组,CD40L+血清组MMP-1、MMP-2活性低于血清组(P<0.05);泻火平突散、活血平突散、养目平突散组MMP-1、MMP-2活性高于CD40L+血清组(P<0.05);养目平突散组MMP-1、MMP-2活性高于泻火平突散组、活血平突散组(P<0.05)。CD40L组TIMP-1、TIMP-2活性高于空白组,CD40L+血清组TIMP-1、TIMP-2活性高于血清组(P<0.05);泻火平突散、活血平突散、养目平突散组TIMP-1、TIMP-2活性低于CD40L+血清组(P<0.05);养目平突散组TIMP-1、TIMP-2活性低于泻火平突散组、活血平突散组(P<0.05)。CD40L组MMP-1/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2低于空白组,CD40L+血清组MMP-1/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2低于血清组(P<0.05);泻火平突散、活血平突散、养目平突散组MMP-1/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2高于CD40L+血清组(P<0.05);养目平突散组MMP-1/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2高于泻火平突散组、活血平突散组(P<0.05)。结论平突散系列复方可能通过阻断CD40-CD40L共刺激信号通路导致MMP/TIMP的失衡,而达到治疗TAO的目的。
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