硬脂酰辅酶A去饱和酶-1过表达影响高脂诱导的肝细胞凋亡

作者：蔡德丰; 范建高; 马东礼; 吴跃平; 陆元善

来源：中华肝脏病杂志, 2014, 22(01): 48-52.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2014.01.011

• 细胞凋亡
• 硬脂酰辅酶A去饱和酶-1
• 软脂酸

目的探讨硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD1)过表达影响大鼠BRL肝细胞凋亡的机制。方法锥虫兰染色检测软脂酸诱导BRL肝细胞的死亡率以确定下游实验软脂酸添加浓度。预实验确定慢病毒pGC-FU-GFP在大鼠BRL肝细胞中复感染指数。细胞培养分为两大类:非软脂酸加入组,包括一般培养细胞组(CON)、一般培养加阴性病毒对照组(NC)及一般培养过表达病毒组(SCD1-LV),软脂酸加入组,包括一般培养加软脂酸组(CON+)、一般培养加阴性病毒和软脂酸组(NC+)及一般培养加过表达病毒和软脂酸组(SCD1-LV+)。实时荧光定量PCR检测SCD1mRNA,碘化丙啶染色检测各组细胞凋亡隋况并进行周期分析。对数据进行方差分析或非参数秩和检验的Kruskal-Wallis H检验、Mann-Whitney U检验。结果 400μmol/L的软脂酸诱导72h后BRL细胞的死亡率显著上升(P<0.01),病毒的复感染指数为20。与CON和NC组相比,CON+和NC+组SCD1 mRNA表达水平明显下降,SCD1-LV和SCD1-LV+表达水平上升,各组SCD1mRNA的相对表达水平分别为2.36±0.59、2.17±0.46、1.20±0.44、1.00±0.36、7.11±0.55、13.64±0.63,F=289,P<0.01。CON、NC及SCD1-LV组S期细胞比例差异无统计学意义(P=0.137);CON+和NC+组出现明显的凋亡峰,且细胞周期中S期细胞比例显著下降,细胞增殖能力下降,SCD1-LV+组凋亡细胞比例显著减少。结论 pGC-FU-SCD1-GFP慢病毒载体感染BRL肝细胞,SCD1表达水平显著升高,增强细胞对饱和脂肪酸的去饱和作用,过表达SCD1降低软脂酸诱导的脂毒性和凋亡作用。

• 单位
  深圳市儿童医院; 上海交通大学