摘要
目的:探讨外泌体在肝癌细胞与巨噬细胞之间是否存在活性物质交通作用,分析肿瘤微环境中的肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)与肝癌转移的关系及机理。方法:用超速离心法从正在培养细胞的培养基中提取外泌体,Western blot和透射电镜进行外泌体鉴定;激光共聚焦显微镜对外泌体与受体细胞结合内化进行追踪;qRT-PCR及ELISA检测巨噬细胞表型变化;microRNA(miRNA)模拟物进行功能性实验来验证其作用;细胞划痕以及Transwell试验检测TAMs对肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响。结果:肝癌细胞外泌体能够被巨噬细胞内吞;使用肝癌细胞外泌体及miRNA-151模拟物处理后的巨噬细胞M2型标记物CD206、Arg-1的mRNA表达水平及IL-10、TGF-β的蛋白表达水平显著高于对照组(各P<0.05);TAMs外泌体处理组肝癌细胞迁移及侵袭能力高于其他组(各P<0.05)。结论:肝癌细胞来源的外泌体miRNA-151可诱导巨噬细胞极化为TAMs,TAMs对肝癌细胞的迁移及侵袭有促进作用。
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