牙本质基质蛋白-1对白细胞介素-1β诱导的大鼠软骨细胞炎症损伤的研究

作者：鲁斌; 程加峰; 汪洋; 冀林; 王岩松; 赵平^*

来源：实用骨科杂志, 2022, 28(11): 991-996.

DOI：10.13795/j.cnki.sgkz.2022.11.010

• 牙本质基质蛋白-1
• 软骨细胞
• 炎症
• 骨关节炎

目的 探索牙本质基质蛋白(dentin matrix protein, DMP)-1基因对骨关节炎(osteoarthritis, OA)中软骨细胞的作用。方法 Affymetrix微阵列分析OA大鼠模型中软骨细胞中DMP-1的水平；建立OA体外模型并分离和培养软骨细胞；DMP-1基因转染软骨细胞；采用细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK-8)法检测DMP-1对软骨细胞增殖的影响；酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immuno sorbent assay, ELISA)法检测软骨细胞糖胺聚糖(glycosaminoglycan, GAG)分泌情况和促炎细胞因子[白细胞介素(interleukin, IL)-6和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α]的水平；免疫荧光观察Col2a1的表达情况；实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测DMP-1、Sox9、Acan、Col2a1基因的表达水平；蛋白质印迹法(western blot, WB)定量分析DMP-1、Sox9、Acan、Col2a1;流式细胞仪和活细胞/死细胞双染(Calcein-AM/PI)染色检测DMP-1对软骨细胞抗凋亡能力的影响。结果 OA的体内模型中微阵列分析DMP-1表达水平低于对照组(P<0.05);体外OA模型的软骨细胞中DMP-1表达水平低于对照组(P<0.001);转染DMP-1质粒后，软骨细胞及IL-1β处理的软骨细胞的DMP-1表达水平高于未转染组，IL-1β处理的软骨细胞的活力高于未转染组(P<0.001);IL-1β诱导的转染DMP-1软骨细胞GAG表达情况、Col2a1免疫荧光表达情况明显低于未转染组，Sox9、Acan、Col2a1表达水平明显低于未转染组(P<0.001);IL-1β诱导的转染DMP-1软骨细胞分泌IL-6、TNF-α水平和细胞凋亡情况明显低于未转染组(P<0.001)。结论 DMP-1可以用来转染软骨细胞，减轻OA的进展。

• 单位
  芜湖市第一人民医院; 哈尔滨医科大学附属第一医院; 哈尔滨市第一医院