摘要
目的探讨利用siRNA下调骨髓基质细胞系ST2细胞中Spry1的内源性表达对脂肪细胞分化的调控作用。方法设计Spry1的靶向si RNA作为实验组,以转染Control si RNA作为对照组。在ST2细胞中转染Spry1si RNA和Control si RNA并进行成脂诱导,应用q RT-PCR检测2组细胞中的Spry1和成脂特异性因子过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ、CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)α、脂肪细胞表征因子FABP4、脂肪因子adipsin的m RNA表达水平。脂肪细胞分化成熟后,进行油红O染色,显微镜下观察脂肪细胞的染色情况及Spry1 si RNA对ST2细胞成脂分化的影响。运用异丙醇萃取染色的脂肪细胞中的油红O并测定波长在520 nm处的光密度(OD)值。结果转染Spry1 si RNA于ST2细胞后,与转染Control si RNA的对照组相比,Spry1基因的表达水平明显下调,Spry1 si RNA可抑制脂肪细胞的分化,油红O染色显示实验组的脂肪细胞明显减少且OD值低于对照组;转染Spry1si RNA实验组的成脂特异性因子PPARγ、C/EBPα、FABP4、adipsin的m RNA表达水平显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Spry1 siRNA可有效抑制前体细胞向脂肪细胞分化。
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单位天津医科大学代谢病医院; 天津医科大学; 基础医学院; 天津医科大学口腔医院