类固醇受体辅助活化因子-1在胶质母细胞瘤中的表达及其对上皮间质转化的作用探讨

作者：赵钧锋; 李翔宇; 王迅^*

来源：大医生, 2023, 8(03): 119-122.

• 胶质母细胞瘤
• 上皮间质转化
• 类固醇受体辅助活化因子-1

目的 探讨胶质母细胞瘤（GBM）细胞模型中类固醇受体辅助活化因子-1(SRC-1)的表达，并分析SRC-1表达与上皮间质转化（EMT）、肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的相关性。方法 构建SRC-1敲低和过表达的细胞株，免疫染色、聚合酶链反应（Real-time PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）检测各细胞中SRC-1表达情况；Real-time PCR和Western blot检测细胞中钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白（Vimentin）、Twist相关蛋白1(Twist1)等EMT相关基因的表达。结果 SRC-1的平均m RNA表达log2 (T/N)比为0.58。SRC-1细胞中明显上调。Western blot进一步验证了SRC-1的上调，SRC-1蛋白在肿瘤细胞中明显过表达。肿瘤细胞中SRC-1的免疫组化染色显示高表达；在几种细胞系中检测了SRC-1的蛋白表达，发现SRC-1在人脑胶质细胞U251和U87MG中高表达，在人脑胶质细胞T98MG、LN229及SVG p12中低表达；使用慢病毒的shRNA表达系统抑制细胞系中的SRC-1的表达，SRC-1蛋白表达被sh-SRC-1显著下调（P<0.05）；下调SRC-1抑制了Twist1蛋白的表达（P<0.05）。此外，敲低SRC-1可增加E-cadherin的表达（P<0.05），抑制Vimentin的表达（P <0.05）；采取替莫唑胺（TMZ）、索拉菲尼（SOR）胶质母细胞瘤临床治疗用药联合SRC-1敲低进行四唑盐（MTT）比色法实验，48 h检测增殖能力。与独加药组比较，SRC-1敲低后在500μmol/L和1 000μmol/L浓度的TMZ时都能更好地抑制U251细胞增殖（P<0.05）,50μmol/L和80μmol/L浓度的SOR得出相似的结果（P>0.05），表明敲低SRC-1能增强胶质母细胞瘤细胞对TMZ和SOR的敏感性。结论 SRC-1在体外可促进胶质母细胞瘤细胞的非锚定生长、细胞迁移和侵袭，与诱导EMT过程有关。

• 单位
  大连市第三人民医院