摘要

目的探讨外泌体miR-940在前列腺癌(PCa)骨转移中的作用。方法采集2017年6月在温州医科大学附属第一医院就诊的3例正常老年男性及3例PCa骨转移患者的血清标本,采用RT-PCR法检测血清外泌体中微小RNA(miRNA)表达并绘制miRNA谱。培养PCa细胞株PC-3及正常前列腺上皮细胞株RWPE-1,提取并鉴定细胞外泌体;采用RT-PCR法检测细胞外泌体中miR-940表达。PC-3细胞经转染后与人骨髓间充质干细胞(hMSC)共培养48 h,采用RT-PCR法检测成骨细胞分化相关基因表达,Von Kossa染色法检测矿化面积占比。结果与正常老年男性比较,PCa骨转移患者血清外泌体中多个miRNA表达明显升高,其中miR-940尤为明显。在电镜下,PC-3细胞外泌体呈40100 nm的盘状囊泡,外泌体标志性蛋白VDAC、CD63、Hs p 70、CD81表达均明显上调。PC-3细胞外泌体中miR-940表达明显高于RWPE-1细胞外泌体(P<0.05)。在PCa-hMSC共培养体系中,miR-940过表达组ALP、骨钙素(BGLAP)基因表达及矿化面积占比较miR-940敲减组、空白对照组均明显降低(均P<0.05)。结论外泌体miR-940可以有效抑制PCa-hMSC成骨分化,这为转移性PCa个体化治疗提供了新的靶点。

  • 单位
    温州医科大学附属第一医院