改良一步法制备人外周血白细胞线粒体DNA

作者:贾立明; 叶明福; 刘丽红; 孙玉兰; 孙恒文; 谢启超; 李军果; 钱桂生; 房殿春; 胡义德
来源:第三军医大学学报, 2004, (15): 1407-1409.
DOI:10.16016/j.1000-5404.2004.15.030

摘要

目的 建立从少量外周血中提取白细胞线粒体DNA(mtDNA)的快速、简便方法。方法  5 8份抗凝血静置后取白细胞层 ,采用碱变性法裂解细胞 ,酚 氯仿 异戊醇抽提 ,RNA酶消化后再抽提及沉淀 ,PCR扩增产物电泳鉴定。结果 获得的mtDNA样品不存在蛋白质等污染 ,用特异性mtDNAPCR引物从 5 8例核酸样品中均能扩增出 15 2 8bp的mtDNA基因片段。结论 改良一步法是一种省时、经济、实用、重复性好、能满足常规分子生物学和遗传学分析需要的mtDNA制备新方法

  • 单位
    西南医院; 第三军医大学新桥医院

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