实时定量PCR检测多发性骨髓瘤骨髓细胞黑色素瘤抗原-C1/癌睾丸抗原7基因的表达水平

作者:张瑶; 鲍立; 陈欢; 李金兰; 李玲娣; 秦亚溱; 石红霞; 刘艳荣; 刘开彦; 黄晓军; 陈珊珊; 阮国瑞
来源:中华临床医师杂志(电子版), 2011, 5(10): 2839-2844.

摘要

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞中黑色素瘤抗原-C1/癌睾丸抗原7(MAGE-C1/CT7)基因的表达水平并初步探讨其临床意义。方法制备含MAGE-C1/CT7基因克隆片段的质粒标准品,采用实时定量PCR技术制作定量评估MAGE-C1/CT7拷贝数的标准曲线,并利用该技术检测MM患者骨髓细胞中MAGE-C1/CT7基因的表达水平。来自同种基因移植供者的正常人骨髓细胞作为对照。结果检测含MAGE-C1/CT7基因克隆片段的质粒的灵敏度可达1个拷贝,在MAGE-C1/CT7表达阳性的患者样本中,其检测灵敏度可达10-5~10-4。在77份MM患者骨髓样本中,有66份检出MAGE-C1/CT7基因表达,阳性率达85.7%,其中初治、难治复发患者中表达阳性率达88.3%(45/51),同时检测的22例正常供者骨髓样本均为阴性。此外,MAGE-C1/CT7表达量与骨髓浆细胞数呈正相关(r=0.435,P<0.05,n=25),与流式细胞术检测的CD38+/CD138+细胞数呈正相关(r=0.410,P<0.05,n=31)。结论建立的实时定量PCR可灵敏地检测MM患者MAGE-C1/CT7基因表达水平,而MAGE-C1/CT7基因水平可能成为临床辅助诊断MM的一个参考指标。