摘要
目的 通过呼吸道合胞病毒(RSV)感染人Jurkat细胞(T淋巴细胞白血病细胞),观察Jurkat细胞增殖及凋亡情况,探讨RSV是否对Jurkat细胞具有溶瘤作用及可能机制。方法 将RSV感染Jurkat细胞,设未感染RSV的Jurkat细胞为空白对照组(con),在感染后不同时间点(3、6、12、24、48 h)收集细胞。采用qRT-PCR检测RSV-NS2(呼吸道合胞病毒非结构蛋白2)以了解Jurkat细胞感染RSV情况,MTT、克隆形成实验检测Jurkat细胞的增殖,FCM检测Jurkat细胞的凋亡水平,qRT-PCR检测TRAF6(肿瘤坏死因子受体相关因子6)的表达,Western blot检测Bcl2、TRAF6、NF-κB和cleaved Caspase-3、8、9的表达。结果 RSV感染Jurkat细胞,q RT-PCR检测到Jurkat细胞在感染后3 h内RSV-NS2表达开始出现,6 h明显增高,随时间延长而升高,差异有统计学意义(P <0.05),而TRAF6的表达随感染时间的延长而减少(P <0.05)。MTT结果显示RSV感染后6~24 h,Jurkat细胞的增殖能力显著下降(P <0.05),克隆形成实验示RSV感染Jurkat后12 d,Jurkat细胞的克隆数明显减少(P <0.05),提示RSV抑制了Jurkat细胞增殖。FCM结果显示RSV感染后12~48 h后,Jurkat细胞的凋亡水平显著上升,呈时间依赖性(P <0.05)。Western blot的结果显示,RSV感染12 h以后,cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9的表达均显著增加,Bcl2的表达明显减少,有时间依赖性(P <0.05),cleaved Caspase-8的表达无明显改变,TRAF6和p-NF-κB的表达随感染时间的延长而降低(P <0.05)。结论 降低RSV抑制Jurkat细胞增殖,促进细胞凋亡,通过抑制TRAF6/NF-κB通路发挥对Jurkat细胞的抑制作用,揭示RSV对血液系统肿瘤能产生溶瘤效应。
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单位湖北文理学院; 襄阳市中心医院