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摘要
目的:探讨星形胶质细胞条件培养液在体外能否促进胚胎干细胞(ESCs)向神经元方向分化。方法:在Bain等建立的4-/4+方案基础上,分成两组:单用ATRA组和ATRA联合胎脑星形胶质细胞条件培养液组,分3阶段诱导ESCs定向生成神经元样细胞。形态学观察及畸胎瘤形成试验对ESCs的全能性进行鉴定;免疫组化染色法检测nestin、GFAP、NSE和NF-200的表达对诱导过程进行动态监测。结果:(1)体外培养的小鼠ESC-D3细胞在胚胎成纤维饲养层细胞上连续传代培养,仍保持向3胚层分化的能力。(2)在诱导分化阶段,联合诱导组分化细胞NF-200和NSE的表达阳性率高于单用ATRA组。(3)联合诱导组最终诱导ESCs生成纯度高达73.5%神经元样细胞。结论:采用胚胎脑星形胶质细胞条件培养液可较高产率及纯度地促进ESCs生成神经元样细胞,值得推广应用。
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