白藜芦醇对婴儿血管瘤内皮细胞活性的影响

作者：杨开颖; 邱桐; 龚雪; 兰钰茹; 周江元; 陈思源; 吉毅^*

来源：中华皮肤科杂志, 2022, 55(11): 990-995.

• 血管瘤
• 人脐静脉内皮细胞
• 葡萄糖转运体1型
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 白藜芦醇

目的研究葡萄糖转运体1(Glut-1)抑制剂白藜芦醇(RSV)对婴儿血管瘤内皮细胞(HemEC)活性的影响。方法收集4例增殖期与4例消退期婴儿血管瘤(IH)组织, 采用免疫组化观察Glut-1的表达。从4例增殖期IH组织中提取原代HemEC, 采用qPCR与Western印迹检测HemEC与对照脐静脉内皮细胞(HUVEC)中Glut-1 mRNA与蛋白的表达水平。体外培养HemEC, 分别采用0(对照组)、50、100、200、400、800 μmol/L RSV干预24 h, 采用CCK-8法检测各组HemEC增殖能力, 计算半抑制浓度(IC50)。分别采用Transwell实验、流式细胞仪观察HemEC迁移能力及凋亡水平。组间比较采用t检验或方差分析, 组间多重比较采用LSD-t检验。结果免疫组化显示, 增殖期及消退期IH组织中血管内皮细胞Glut-1均阳性, 但增殖期表达丰富, 消退期表达明显降低。HemEC中Glut-1 mRNA及蛋白表达水平(1.793 ± 0.041、1.959 ± 0.144)均高于HUVEC(0.820 ± 0.073、0.648 ± 0.046, t = 16.35、12.28, 均P < 0.001)。采用Glut-1抑制剂RSV干预HemEC后, 0 ～ 800 μmol/L组HemEC增殖活性差异有统计学意义(F = 1 043.00, P < 0.001), 所有RSV干预组HemEC的增殖活性均低于对照组(P < 0.05)。GraphPad Prism 8计算得出RSV IC50浓度为150 μmol/L, Transwell实验与流式细胞仪检测显示, 150 μmol/L RSV干预组HemEC组细胞迁移数(61 ± 5)低于对照组(150 ± 6, t = 15.11, P < 0.001), 凋亡率(13.01% ± 0.45%)高于对照组(3.93% ± 0.68%, t = 19.34, P < 0.001)。结论糖酵解关键酶Glut-1在IH增殖期组织与HemEC中高表达, RSV干预可以抑制HemEC增殖及迁移能力并促进其凋亡。

• 单位
  四川大学华西医院