山楂叶总黄酮抑制小胶质细胞活化对脊髓损伤的影响

作者:黄洁琼; 韦入菲; 刘槃; 冯彦斌; 朱婷; 黄瑞; 李惠华; 宗少晖; 曾高峰*
来源:广西医科大学学报, 2023, 40(04): 586-593.
DOI:10.16190/j.cnki.45-1211/r.2023.04.010

摘要

目的:探究山楂叶总黄酮(TFHL)对脂多糖(LPS)活化后的BV2小胶质细胞和脊髓损伤(SCI)大鼠的作用。方法:LPS诱导BV2小胶质细胞活化建立神经炎症模型;实验分为正常对照组、LPS组及TFHL低、中、高剂量组。根据Allen’s法建立SCI模型;将大鼠随机分为假手术组、模型组和TFHL组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、COX-2的mRNA表达;流式细胞术检测活性氧(ROS)水平;蛋白免疫印迹检测TNF-α、IL-6的蛋白表达;Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估SCI大鼠的运动功能;苏木精—伊红(HE)染色观察脊髓组织结构完整性。结果:在细胞实验中,与正常对照组相比,LPS组和TFHL各剂量组TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、COX-2的mRNA相对表达水平均增高(P<0.000 1);TFHL低剂量组的TNF-α、IL-6,TFHL中剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6以及TFHL高剂量组的TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS、COX-2的mRNA表达水平均较LPS组降低(P<0.05)。与正常对照组相比,LPS组和TFHL各剂量组TNF-α、IL-6的蛋白表达量增高(P<0.000 1),而TFHL中剂量组的IL-6及TFHL高剂量组的TNF-α、IL-6蛋白表达量均较LPS组降低(P<0.01)。与正常对照组相比,LPS组和TFHL各剂量组ROS水平均升高(P<0.000 1),而TFHL各剂量组的ROS水平均较LPS组下降(P<0.000 1)。在动物实验中,与假手术组相比,模型组和TFHL组BBB评分均降低(P<0.000 1),TFHL组第5天和第7天BBB评分均较模型组增高(P<0.05)。与模型组相比,TFHL组脊髓病理结构较完整,空洞面积较少。结论:TFHL可通过抑制小胶质细胞的激活,改善炎症微环境,从而发挥保护受损脊髓神经运动功能的作用。