微小RNA-16-5p通过调控AKT3抑制肝癌细胞增殖和迁移

作者：刘晓龙; 张雅敏^*; 许洋

来源：广东医学, 2019, 40(17): 2428-2433.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.20184049

• 微小RNA
• 肝细胞癌
• 侵袭
• 增殖
• 迁移

目的探讨微小RNA-16-5p(miR-16-5p)通过靶向调控丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3(AKT3)通路,进而抑制肝癌细胞的增殖和迁移能力。方法使用qRT-PCR技术及免疫组化染色测定人肝癌组织中miR-16-5p和AKT3含量,比较miRNA-16-5p与AKT3的相关性。体外培养肝癌细胞SMMC-7721,使用miR-16-5p激活剂(mimic)转染细胞,加入AKT3特定干扰RNA转染细胞以敲除AKT3。Western blot检测AKT3和肿瘤转移相关标记蛋白[钙黏附分子N(N-cadherin)、Snail蛋白(Snail)、波形蛋白(Vimentin)、胞质紧密粘连蛋白1(ZO-1)]表达水平。Transwell实验检测肝癌细胞侵袭和迁移能力。CCK-8试剂盒和平板克隆实验检测肝癌细胞增殖能力。结果肝癌组织中miR-16-5p低表达,而AKT3高表达,miR-16-5p与AKT3呈负性相关。SMMC-7721肝癌细胞系中过表达miR-16-5p,Transwell显示mimic组较NC组肝癌细胞侵袭和迁移能力降低,Western blot显示N-Cadherin、Vimentin、ZO-1表达降低;敲除AKT3后可见N-Cadherin和Snail表达下降,平板克隆实验结果显示肝癌细胞增殖能力下降,CCK-8检测显示肝癌细胞活性下降。结论 miRNA-16-5p能靶向调控AKT3通路,从而抑制肝癌细胞的增殖和迁移能力。

• 单位
  天津市第一中心医院; 天津医科大学