Twist1在人皮肤成纤维细胞中的表达及其对细胞增殖的影响

作者：王淑华; 彭亚婷; 张志彬; 刘志刚^*; 姜美英; 张颖鹏

来源：中国皮肤性病学杂志, 2019, 33(07): 741-746.

DOI：10.13735/j.cjdv.1001-7089.201810030

• Twist1
• 人皮肤成纤维细胞
• 复制性衰老
• 增殖

目的探讨Twist1对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及其可能机制。方法组织块贴壁法提取人皮肤成纤维细胞(HSFs),通过连续传代建立人皮肤成纤维细胞的复制性衰老模型。将传代的HSFs分为年轻组(P3～7)、衰老组(P20～25),通过β-半乳糖核苷酶染色法比较衰老染色率、EdU检测细胞增殖率的变化以及Western blot法检测衰老相关蛋白p21表达的差异来验证复制性衰老模型是否成功建立。通过Western blot法检测Twist1分别在年轻组与衰老组的表达情况。接着在年轻组中,通过转染Si-Twist1序列,使Twist1的表达下降,EdU检测HSFs增殖率的变化。结果相比于年轻组,衰老组HSFs的SA-β-gal染色率明显增加,细胞增殖率明显下降,衰老相关蛋白p21的表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。以上实验结果表明,已成功建立了HSFs的复制性衰老模型。另外Western blot发现Twist1蛋白在年轻组HSFs中的表达水平显著高于衰老组(P<0.05),EdU提示在Si-Twist1组比NC组的细胞增殖率明显下降(P<0.05)。结论 Twist1在衰老组HSFs中表达明显下调,在体外抑制Twist1的表达可引起HSFs的增殖率的下降,这为探讨Twist1与皮肤成纤维细胞衰老的相关研究提供了依据。

• 单位
  南昌大学第二附属医院